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robinsonheli.com.cn | 文章來源：微元生物 | 作者：gzwybio | 發(fā)布日期：2015-07-13 16:11:19 | 點擊：50369
標(biāo)簽：農(nóng)用微生物菌劑
農(nóng)用微生物菌劑國家標(biāo)準(zhǔn)：GB 20287-2006。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了農(nóng)用微生物菌劑的術(shù)語和定義、產(chǎn)品分類、要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、包裝、標(biāo)識、運輸和貯存。本標(biāo)準(zhǔn)適用于農(nóng)用微生物菌劑類產(chǎn)品。
農(nóng)用微生物菌劑國家標(biāo)準(zhǔn)（GB 20287-2006）
前 言
本標(biāo)準(zhǔn)的5.1、5.3 和第8 章條文為強制性條款，其余為推薦性條款。
本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄C 和附錄D 為規(guī)范性附錄，附錄B 為資料性附錄。
農(nóng)用微生物菌劑
1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了農(nóng)用微生物菌劑（即微生物接種劑）的術(shù)語和定義、產(chǎn)品分類、要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、包裝、標(biāo)識、運輸和貯存。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于農(nóng)用微生物菌劑類產(chǎn)品。
2 規(guī)范性引用文件（略）
3 術(shù)語和定義（略）
4 產(chǎn)品分類
產(chǎn)品按劑型可分為液體、粉劑、顆粒型；按內(nèi)含的微生物種類或功能特性可分為根瘤菌菌劑、固氮菌菌劑、解磷類微生物菌劑、硅酸鹽 微生物菌劑、光合細(xì)菌菌劑、有機物料腐熟劑、促生菌劑、菌根菌劑、生物修復(fù)菌劑等。
5 要求
5.1 菌種
生產(chǎn)用的微生物菌種應(yīng)安全、有效。生產(chǎn)者應(yīng)提供菌種的分類鑒定報告，包括屬及種的學(xué)名、形態(tài)、生理生化特性及鑒定依據(jù)等完整 資料。生產(chǎn)者應(yīng)提供菌種安全性評價資料。采用生物工程菌，應(yīng)具有允許大面積釋放的生物安全性有關(guān)批文。
5.2 產(chǎn)品外觀（略）
5.3 產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)
5.3.1 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)見表1，其中有機物料腐熟劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)按表2 執(zhí)行。
表1 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)
a 復(fù)合菌劑，每一種有效菌的數(shù)量不得少于0.01 億/g(mL)；以單一的膠質(zhì)芽胞桿菌（Bacillus mucilaginosus）制
成的粉劑產(chǎn)品中有效活菌數(shù)不少于1.2 億/g。
b 此項僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認(rèn)為有必要時檢測。
表2 有機物料腐熟劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)
a 以農(nóng)作物秸稈類為腐熟對象測定纖維素酶活。
b 以畜禽糞便類為腐熟對象測定蛋白酶活。
c 此項僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認(rèn)為有必要時檢測。
5.3.2 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品中無害化指標(biāo)見表3。
表3 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的無害化技術(shù)指標(biāo)
參數(shù) 標(biāo)準(zhǔn)極限
糞大腸菌群數(shù)，個/g(mL) ≤ 100
蛔蟲卵死亡率，% ≥ 95
砷及其化合物（以As 計），mg/kg ≤ 75
鎘及其化合物（以Cd 計），mg/kg ≤ 10
鉛及其化合物（以Pb 計），mg/kg ≤ 100
鉻及其化合物（以Cr 計），mg/kg ≤ 150
汞及其化合物（以Hg 計），mg/kg ≤ 5 6
試驗方法
6.1 儀器設(shè)備（略）
6.2 試劑（略）
6.3 產(chǎn)品參數(shù)的檢測
6.3.1 外觀(感官)的測定
取少量樣品放到白色搪瓷盤(或白色塑料調(diào)色板)中，仔細(xì)觀察樣品的顏色、形狀、質(zhì)地。
6.3.2 有效活菌數(shù)的測定
采用平板計數(shù)法，根據(jù)所測微生物的種類選用適宜的培養(yǎng)基。
若采用最大可能數(shù)（Most Probable Number，MPN）5 管法，遵照附錄C 的規(guī)定。
6.3.2.1 系列稀釋
稱取樣品10 g（精確到0.01 g），加入帶玻璃珠的100 mL 的無菌水中(液體菌劑取l0.0 mL 加入90 mL 的無菌水中)，靜置20 min，在 旋轉(zhuǎn)式搖床上200 r/min 充分振蕩30 min，即成母液菌懸液（基礎(chǔ)液）。
用無菌移液管分別吸取5.0mL 上述母液菌懸液加入45 mL 無菌水中，按1:10 進(jìn)行系列稀釋，分別得到1:1×10 1 ，1:1×10 2 ，1:1×10 3 ， 1:1×10 4 ……稀釋的菌懸液（每個稀釋度應(yīng)更換無菌移液管）。
6.3.2.2 加樣及培養(yǎng)
每個樣品取3 個連續(xù)適宜的稀釋度，用無菌移液管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1 mL，加至預(yù)先制備好的固體培養(yǎng)基平板上，分別用無 菌玻璃刮刀將不同稀釋度的菌懸液均勻地涂于瓊脂表面。
每一稀釋度重復(fù)3 次，同時以無菌水作空白對照，于適宜的條件下培養(yǎng)。
6.3.2.3 菌落識別
根據(jù)所檢測菌種的技術(shù)資料，每個稀釋度取不同類型的代表菌落通過涂片、染色、鏡檢等技術(shù)手段確認(rèn)有效菌。當(dāng)空白對照培養(yǎng)皿出現(xiàn) 菌落數(shù)時，檢測結(jié)果無效，應(yīng)重做。
6.3.2.4 菌落計數(shù)
以出現(xiàn)20~300 個菌落數(shù)的稀釋度的平板為計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)（絲狀真菌為10~150 個菌落數(shù)），分別統(tǒng)計有效活菌數(shù)目和雜菌數(shù)目。當(dāng)只有一 個稀釋度，其平均菌落數(shù)在20～300 個之間時，則以該平均菌落數(shù)計算。若有兩個稀釋度，其平均菌落數(shù)均在20～300 個之間時，應(yīng)按 兩者菌落總數(shù)之比值決定。若其比值小于等于2 應(yīng)計算兩者的平均數(shù)；若大于2 則以稀釋度小的菌落平均數(shù)計算。有效活菌數(shù)按式（1） 或式（2）計算：
nm = Xkv1/(m0v2) ×10 -8 …………………（1）
nv = Xkv1/(v0v2) ×10 -8 …………………（2）
式中：
nm — 質(zhì)量有效活菌數(shù)， 億/g
nv — 體積有效活菌數(shù)， 億/mL
X— 菌落平均數(shù)， 個
k — 稀釋倍數(shù)
v1 — 基礎(chǔ)液體積，
mL v2 — 菌懸液加入量， mL
v0 — 樣品量， mL
m0 — 樣品量， g
6.3.3 霉菌雜菌數(shù)的測定
采用馬丁培養(yǎng)基，測定方法同6.3.2。
6.3.4 雜菌率的測定
除樣品有效菌外其它的菌均為雜菌。樣品中雜菌率按式（3）計算：
m = n1/(n1+n)×100 …………………（3）
式中：
m — 樣品雜菌率， %
n1
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