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robinsonheli.com.cn | 文章來源:微元生物 | 作者:gzwybio | 發(fā)布日期:2015-07-13 16:11:19 | 點擊:50368
標簽:農用微生物菌劑
農用微生物菌劑國家標準:GB 20287-2006。本標準規(guī)定了農用微生物菌劑的術語和定義、產品分類、要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、包裝、標識、運輸和貯存。本標準適用于農用微生物菌劑類產品。
農用微生物菌劑國家標準(GB 20287-2006)
前 言
本標準的5.1、5.3 和第8 章條文為強制性條款,其余為推薦性條款。
本標準的附錄A、附錄C 和附錄D 為規(guī)范性附錄,附錄B 為資料性附錄。
農用微生物菌劑
1 范圍 本標準規(guī)定了農用微生物菌劑(即微生物接種劑)的術語和定義、產品分類、要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、包裝、標識、運輸和貯存。
本標準適用于農用微生物菌劑類產品。
2 規(guī)范性引用文件(略)
3 術語和定義(略)
4 產品分類
產品按劑型可分為液體、粉劑、顆粒型;按內含的微生物種類或功能特性可分為根瘤菌菌劑、固氮菌菌劑、解磷類微生物菌劑、硅酸鹽 微生物菌劑、光合細菌菌劑、有機物料腐熟劑、促生菌劑、菌根菌劑、生物修復菌劑等。
5 要求
5.1 菌種
生產用的微生物菌種應安全、有效。生產者應提供菌種的分類鑒定報告,包括屬及種的學名、形態(tài)、生理生化特性及鑒定依據等完整 資料。生產者應提供菌種安全性評價資料。采用生物工程菌,應具有允許大面積釋放的生物安全性有關批文。
5.2 產品外觀(略)
5.3 產品技術指標
5.3.1 農用微生物菌劑產品的技術指標見表1,其中有機物料腐熟劑產品的技術指標按表2 執(zhí)行。
表1 農用微生物菌劑產品的技術指標
a 復合菌劑,每一種有效菌的數量不得少于0.01 億/g(mL);以單一的膠質芽胞桿菌(Bacillus mucilaginosus)制
成的粉劑產品中有效活菌數不少于1.2 億/g。
b 此項僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認為有必要時檢測。
表2 有機物料腐熟劑產品的技術指標
a 以農作物秸稈類為腐熟對象測定纖維素酶活。
b 以畜禽糞便類為腐熟對象測定蛋白酶活。
c 此項僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認為有必要時檢測。
5.3.2 農用微生物菌劑產品中無害化指標見表3。
表3 農用微生物菌劑產品的無害化技術指標
參數 標準極限
糞大腸菌群數,個/g(mL) ≤ 100
蛔蟲卵死亡率,% ≥ 95
砷及其化合物(以As 計),mg/kg ≤ 75
鎘及其化合物(以Cd 計),mg/kg ≤ 10
鉛及其化合物(以Pb 計),mg/kg ≤ 100
鉻及其化合物(以Cr 計),mg/kg ≤ 150
汞及其化合物(以Hg 計),mg/kg ≤ 5 6
試驗方法
6.1 儀器設備(略)
6.2 試劑(略)
6.3 產品參數的檢測
6.3.1 外觀(感官)的測定
取少量樣品放到白色搪瓷盤(或白色塑料調色板)中,仔細觀察樣品的顏色、形狀、質地。
6.3.2 有效活菌數的測定
采用平板計數法,根據所測微生物的種類選用適宜的培養(yǎng)基。
若采用最大可能數(Most Probable Number,MPN)5 管法,遵照附錄C 的規(guī)定。
6.3.2.1 系列稀釋
稱取樣品10 g(精確到0.01 g),加入帶玻璃珠的100 mL 的無菌水中(液體菌劑取l0.0 mL 加入90 mL 的無菌水中),靜置20 min,在 旋轉式搖床上200 r/min 充分振蕩30 min,即成母液菌懸液(基礎液)。
用無菌移液管分別吸取5.0mL 上述母液菌懸液加入45 mL 無菌水中,按1:10 進行系列稀釋,分別得到1:1×10 1 ,1:1×10 2 ,1:1×10 3 , 1:1×10 4 ……稀釋的菌懸液(每個稀釋度應更換無菌移液管)。
6.3.2.2 加樣及培養(yǎng)
每個樣品取3 個連續(xù)適宜的稀釋度,用無菌移液管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1 mL,加至預先制備好的固體培養(yǎng)基平板上,分別用無 菌玻璃刮刀將不同稀釋度的菌懸液均勻地涂于瓊脂表面。
每一稀釋度重復3 次,同時以無菌水作空白對照,于適宜的條件下培養(yǎng)。
6.3.2.3 菌落識別
根據所檢測菌種的技術資料,每個稀釋度取不同類型的代表菌落通過涂片、染色、鏡檢等技術手段確認有效菌。當空白對照培養(yǎng)皿出現 菌落數時,檢測結果無效,應重做。
6.3.2.4 菌落計數
以出現20~300 個菌落數的稀釋度的平板為計數標準(絲狀真菌為10~150 個菌落數),分別統(tǒng)計有效活菌數目和雜菌數目。當只有一 個稀釋度,其平均菌落數在20~300 個之間時,則以該平均菌落數計算。若有兩個稀釋度,其平均菌落數均在20~300 個之間時,應按 兩者菌落總數之比值決定。若其比值小于等于2 應計算兩者的平均數;若大于2 則以稀釋度小的菌落平均數計算。有效活菌數按式(1) 或式(2)計算:
nm = Xkv1/(m0v2) ×10 -8 …………………(1)
nv = Xkv1/(v0v2) ×10 -8 …………………(2)
式中:
nm — 質量有效活菌數, 億/g
nv — 體積有效活菌數, 億/mL
X— 菌落平均數, 個
k — 稀釋倍數
v1 — 基礎液體積,
mL v2 — 菌懸液加入量, mL
v0 — 樣品量, mL
m0 — 樣品量, g
6.3.3 霉菌雜菌數的測定
采用馬丁培養(yǎng)基,測定方法同6.3.2。
6.3.4 雜菌率的測定
除樣品有效菌外其它的菌均為雜菌。樣品中雜菌率按式(3)計算:
m = n1/(n1+n)×100 …………………(3)
式中:
m — 樣品雜菌率, %
n1